樣本準(zhǔn)備:首先,需要提取DNA樣本,并進(jìn)行必要的處理,如PCR擴(kuò)增,以便獲得足夠數(shù)量的DNA片段進(jìn)行分析。
測序反應(yīng):在測序反應(yīng)中,使用特定的熒光標(biāo)記的ddNTP(二脫氧核糖核苷酸三磷酸)作為合成DNA鏈的原料。這些標(biāo)記的ddNTP會(huì)在DNA聚合酶的作用下被整合到新合成的DNA鏈上,每插入一個(gè)標(biāo)記的ddNTP,就會(huì)發(fā)出特定顏色的熒光信號(hào)。
毛細(xì)管電泳:將帶有熒光標(biāo)記的DNA片段放入毛細(xì)管中,通過施加電壓,使DNA片段在毛細(xì)管中移動(dòng)。由于不同長度的DNA片段在電場中的遷移速率不同,它們會(huì)按照長度順序分離。
熒光檢測:在毛細(xì)管的特定位置設(shè)有激光檢測器,它能夠檢測通過的熒光信號(hào)。每次插入一個(gè)標(biāo)記的ddNTP,都會(huì)產(chǎn)生一個(gè)熒光信號(hào),這些信號(hào)被激光檢測器捕捉并記錄下來。
數(shù)據(jù)分析:計(jì)算機(jī)軟件接收來自激光檢測器的信號(hào),并將其轉(zhuǎn)換為DNA序列。軟件會(huì)根據(jù)熒光信號(hào)的顏色和強(qiáng)度來確定插入的ddNTP類型,進(jìn)而推斷出DNA序列。
結(jié)果輸出:最后,軟件將解析出的DNA序列以圖形或文本的形式輸出,供科學(xué)家進(jìn)一步分析。
這個(gè)過程可以用來進(jìn)行DNA測序、基因分型、突變檢測等多種分子生物學(xué)研究。不同型號(hào)的基因分析儀可能在具體的技術(shù)細(xì)節(jié)上有所不同,但基本原理大致相同。